ELISA試劑盒總是需要時刻保溫，主要因為ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發作。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的時機，只需靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐步平衡的進程，因而需經分散才干到達反響的終點。
 

　　在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反響的完結需求有一定的溫度和時刻，這一保溫進程稱為溫育，有人稱之為孵育，在試劑盒中似不恰當。
 

　　保溫的方法除有的ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴，可將其置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱，試劑盒應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，終將ELISA板放在濕紗布上。
 

　　濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度，特別是在氣溫較低的時分更應如此。無論是水浴仍是濕盒溫育，反響板均不宜疊放，以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響，操作時的室溫應嚴厲限制在規則的范圍內，規范室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據說明書的要求操控溫育。
 

　　室溫溫育時，試劑盒只需平置于操作臺上即可。應留意溫育的溫度和時刻應按規則力求準確。為確保這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板一起測定。
 

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