技術文章
TECHNICAL ARTICLES在ELISA試劑盒實驗中，用直接法測定抗體，不能直接用酶符號測定抗體，然后直接加入底物。而要加酶標抗抗體呢?如果將酶符號應用于待測抗體，直接法比經(jīng)典法更復雜，在探索符號條件時，不能保證抗體因誤操作而失活;酶標二抗目前已較為常見，被規(guī)模化生產(chǎn)，購買后使用方便。如果你直接做好了，方法已經(jīng)優(yōu)化了，d一抗二抗顯色，總時間加起來，結果不會超過2到3小時。可以使用直接ELISA法，即抗體包板用來在抗原上標記酶，然后顯色，這與直接方法相比，減少了一步的時間，縮短了時間。然而，直接法和直接法...
ELISA試劑盒在實際應用的過程中，得通過不同的設計，不好走和方法都是有很多種類的，像是接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、應用親和素和生物素的ELISA。今天小編就跟大家講講ELISA方法設計都有哪些原理嗯?ELISA試劑盒以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果...
要完成一項漂亮的ELISA實驗，不光要做足實驗的準備，還要對其他各種輔助材料有所了解，這其中防腐劑的運用很重要，ELISA試劑盒中常用的防腐劑有：1.疊氮鈉是HRP的抑制劑，凡是和HRP接觸的試劑，一定不能用;2.硫柳汞在ELISA試劑中可普遍使用，但因其有毒，較少使用;3.市面許多試劑盒產(chǎn)品，用抗生素做防腐劑較多，如慶大。4.如果試劑僅在實驗室短期使用，其實并不需加防腐劑，常規(guī)試劑放4度冰箱，抗體、酶等加甘油分裝凍存即可。5.防污染可添加0.02%的疊氮鈉，或0.01%的硫...
ELISA試劑盒收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮荆瑢吮炯皶r分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。ELISA試劑盒樣本的處理方式:1、組織提取液、肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆?2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，胃液、唾液一般采集時間是空腹采集，一般隔夜尿不采集;3、采集血清時，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室...
咱們在運用ELISA試劑盒96孔板的試驗測定的時分，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應"，也就是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研究證真實溫育中的熱力學梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體，在試驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫(通常在25℃擺布)置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學梯度。因而運用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃)，就可以很容易地掃除“邊緣效應"，而且可進步測定的重復性。ELISA試劑盒還有就是在試驗中...
今天我給大家講講ELISA試劑盒常壓滅菌的操作關鍵：(1)進鍋不擠壓：擺放待滅菌的菌種袋必須分層，每層菌種袋不行擺太擠，要留一定空地，不能彼此擠壓。不適宜將菌種袋臥疊，要分層立放，以確保蒸汽暢流和接種穴無缺。為了防止棉塞易潮濕，可在棉塞上蓋一層薄膜或油紙，但掩蓋物不行太大，否則會影響上基層蒸汽暢流;也可將4個菌種袋的棉塞并攏，棉塞向下一同塞到4個菌種袋的空地中，這樣塑料袋標準要加長，但防潮作用杰出。(2)及時滅菌：隨裝隨滅。配料到滅菌間隔時間越短越好，防止雜菌自繁。大規(guī)模出產(chǎn)...
ELISA試劑盒的應按規(guī)則力求準確在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在試劑盒中似不恰當。ELISA試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有z貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴散才能達到反應的...
ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗，是一種常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法靈敏，特異性強不需要特殊設備，所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在臨床檢驗中除正常反應外，有時常可見到一些錯誤結果(即假陽性或假陰性);在此為大家解讀下ELISA試劑盒檢測受影響因素中標本的影響。溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)，在洗滌...
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